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O -乙釀基測(cè)定法

試劑 （1) 2mol/L鹽酸羥胺溶液稱取鹽酸羥胺

13. 9g，加水溶解并稀釋至100ml，冷處保存。

(2) 3.5mol/L*溶液稱取*14.0g，

3 1 1 8 己二酰肼含量測(cè)定法

加水使溶解并稀釋至100ml。

(3) 4mol/L鹽酸溶液量取鹽酸33.3ml，加水稀釋

至100ml的溶液。

(4) 0. 37mol/L三氯化鐵-鹽酸溶液稱取三氯化鐵

(FeCl3 • 6 H 20) 10. 0 g ,加0. lmol/L鹽酸溶液溶解并稀

釋至100ml。

(5) 堿性羥胺溶液量戚等體積的鹽酸羥胺溶液

(2mol/L)與*溶液（3.5mol/L)混合。3 小時(shí)內(nèi)

使用。

對(duì)照品溶液的制備精密稱取已干燥至恒重的氯化乙

酰膽堿22. 7mg (或溴化乙酰膽堿28. 3 m g ) ,置50ml量瓶

中，加O.OOlmol/L醋酸鈉溶液（pH4. 5) 溶解并稀釋至

刻度，搖勻。

供試品溶液的制備取供試品，用水稀釋成O 乙酰

基濃度為0. 5?2. 5 m m o I / L的溶液。

測(cè)定法精密量取氯化乙酰膽堿（或溴化乙酰膽堿）

對(duì)照品溶液 0. 2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分別

置試管中，補(bǔ)加水至lml，加新鮮配制的堿性羥胺溶液

2 m l ,搖勻，于室溫放置4 分鐘，加4mol/L鹽酸lml, 調(diào)

p H 值至1.2±0.2，搖勻，加0. 37mol/L三氯化鐵-鹽酸

溶液lml，搖勻，照紫外-可見分光光度法（通則0401) ，

在波長(zhǎng)5 4 0 n m處測(cè)定吸光度。另精密量取上述相應(yīng)的系

列對(duì)照品溶液，自“補(bǔ)加水至lml”起，除加酸與加堿性

羥胺的次序顛倒外，同法操作，用作對(duì)應(yīng)的空白對(duì)照。

精密量取供試品溶液l ml置試管中，自“加新鮮配制

的堿性羥胺溶液2ml”起，同法操作；另取供試品溶液

l m i ,與對(duì)照品溶液的空白對(duì)照同法操作，用作供試品的

空白對(duì)照。

將標(biāo)準(zhǔn)管各吸光度分別減去相應(yīng)的空白對(duì)照管的吸光

度，以標(biāo)準(zhǔn)管中所含的對(duì)照品溶液的體積對(duì)其相應(yīng)的吸光

度作直線回歸，將供試品的吸光度減去相應(yīng)的空白對(duì)照管

的吸光度后代入直線回歸方程，計(jì)算出每lml供試品相當(dāng)

于對(duì)照品溶液的體積（V ，ml)。

供試品中0■乙?；浚?/span>mmol/L) = V X 2 . 5

式中2. 5 為對(duì)照品溶液中乙酰膽堿的含量（mmol/L)。