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分光光度計主要技術(shù)指標(biāo)及其檢測方法

這幾年對分光光度計的使用越來越廣泛，并且還在不斷改進(jìn)，以有關(guān)學(xué)科為基礎(chǔ)，目前的分光光度計功能更加齊全。應(yīng)用的范圍擴展到農(nóng)工業(yè)、食品與衛(wèi)生等等研究領(lǐng)域，成為目前我國使用多的測試手段。朗伯-- 比爾定律是分析分光光度法的基礎(chǔ)，所謂的比爾定律就是溶液的吸光度與溶液的濃度還有液層相乘所得出來的數(shù)字呈現(xiàn)正比例變化規(guī)律，分光光度計分為好多種分度計，它們根據(jù)波長的長短進(jìn)行分級。例如紫外光分度計、可見光分度計、紅外光分度計等等。上面所提到的分光光度計基本上都是以光源、單色器、狹縫等等檢測器系統(tǒng)構(gòu)成的。分光光度計當(dāng)中重要的指標(biāo)是波長重復(fù)性、光度準(zhǔn)確性、光度重復(fù)性，同時這幾個指標(biāo)也能夠判斷儀器是否正常。

1 波長準(zhǔn)確度及其檢測方法

所謂的波長準(zhǔn)確度就是，使用某一種測量儀器對一段波長的物質(zhì)譜線進(jìn)行測量，波長理論值與測量出來的值的差稱之為波長準(zhǔn)確度。其能夠有效影響測量正確結(jié)果。一般來說，分光光度法測量是在一段的波長之下進(jìn)行的，被測量的對象在這個地方的吸光程度能夠體現(xiàn)出測量的結(jié)果。波長誤差是真實值與測量值之差，系統(tǒng)誤差與隨機誤差都屬于波長誤差。波長準(zhǔn)確度就是波長的系統(tǒng)誤差，在比較各種儀器所測量的結(jié)果來分析，值得關(guān)注的就是波長準(zhǔn)確度。裝置儀器再進(jìn)制造時儀器沒有處于準(zhǔn)備狀態(tài)而造成的誤差叫波長系統(tǒng)誤差，這種誤差也稱之為機構(gòu)誤差。只不過系統(tǒng)誤差能夠有被消除的可能，另外一個則不行。

(1)    輻射光源法  使用一些有特點的發(fā)射譜線的元素等，用其所產(chǎn)生特定的譜線來檢查儀器，這些特定的元素?zé)舭ü療簟ｋ疅簟⑩c燈等等。因為他們發(fā)射的是線狀光譜，這種光譜有特點并且其準(zhǔn)確度很高，所以是目前被應(yīng)用廣泛的一種。第二個氘燈能夠被用于儀器紫外區(qū)的光源，因為氘燈在紫外區(qū)具備一定的連續(xù)光譜。其實他們這兩種等在可見區(qū)有兩條分離的，強度高的特征譜線。這種特征譜線能夠測量儀器的波長準(zhǔn)確度。因為現(xiàn)在的儀器越來越自動化，所以氘燈經(jīng)常用儀器初始化波長自動定位的標(biāo)準(zhǔn)。汞燈更加便于安裝與攜帶，所以現(xiàn)在汞燈是普遍的檢測工具。大致順序是，首先把汞燈放在儀器光源的地方，燈的透光面與進(jìn)光口對齊，其次，再選取幾條能量強的譜線進(jìn)行測量，在這幾條譜線中選一個大的波長值，多重復(fù)幾次，再去它們的平均數(shù)，這就是后的波長準(zhǔn)確度。

(2)    標(biāo)準(zhǔn)濾光片法  利用多光束干涉原理，在光學(xué)基片上鍍多層介質(zhì)，進(jìn)而制成干涉濾光片。一般情況下，波長的透射峰是干涉濾光片確定的。通過對其中心波長的驗測進(jìn)而確定波長準(zhǔn)確度。這就對干涉慮光片提高了要求，其務(wù)必要有特定的半峰寬窄與大透射比高。在進(jìn)行檢測時，首先把干涉濾光片垂直在光路內(nèi)，讓其從短波朝著長波進(jìn)行運動。得出波長測量值，再把這個數(shù)字與參考值進(jìn)行對比，后得出波長準(zhǔn)確度。定期送檢干涉濾光片是必要的，因為在其中的中心波長會逐漸發(fā)生偏移。采用含稀土元素作為材料進(jìn)行檢測干涉濾光片。稀土元素濾光片再制造時由于方式不同，后導(dǎo)致特征峰波長值出現(xiàn)偏移現(xiàn)象。

(3) 溶液法  因為大部分的稀土元素氧化物溶液有著比較明顯的吸收峰，所以可以利用稀土元素來對儀器的波長準(zhǔn)確度進(jìn)行測量。測定紫外可見分光光度計的氧化溶液應(yīng)用多的是氧化鈥溶液。但是，氧化鈥溶液在特定的波長范圍內(nèi)有比較多的吸收峰，所以在進(jìn)行選擇是要慎重。

2 波長重復(fù)性

進(jìn)行很多次的波長測試之后，分析測試數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)其有一定的離散性，稱之為波長重復(fù)性。其概念也是指分析多次測量結(jié)果的正確程度。波長精密度跟波長重復(fù)性的意思差不多，在測量波長的時候，盡量多測量幾次，再取其大值與小值的差被稱之為波長重復(fù)性。波長準(zhǔn)確度與波長重復(fù)性二者有一定的聯(lián)系，前者指的是儀器系統(tǒng)誤差，后者是儀器的隨機誤差。在進(jìn)行測量時，環(huán)境因素還有波長傳動機構(gòu)不精密等等會影響準(zhǔn)確度，這就是隨機誤差。在進(jìn)行測試時，處于不同的環(huán)境下儀器進(jìn)行測量時，在一個短時間段，對發(fā)射譜線的多次測量，并且測量結(jié)果基本一致，這就是波長重復(fù)性。

3 光度準(zhǔn)確度

實際的測光度值與準(zhǔn)確值之差被稱之為光度準(zhǔn)確度。若想對儀器進(jìn)行正確測量光度準(zhǔn)確度，就必須選擇液體或者是固體的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)檢測儀器的透射比的準(zhǔn)確程度。這里所說的透射比準(zhǔn)確度意思是，某一個儀器對一個標(biāo)準(zhǔn)的透射比值樣品的測量值和理論值之差，稱之為透射比準(zhǔn)確度。這個準(zhǔn)確度并不包括上面所說的隨機誤差，只是指儀器光度值的系統(tǒng)誤差。透射比準(zhǔn)確度能夠準(zhǔn)確反映出儀器的各方面綜合性能，其是否準(zhǔn)確是使用者關(guān)心的問題。

4 光度重復(fù)性

光度重復(fù)性是指在不考慮系統(tǒng)誤差時，在相同的環(huán)境下，進(jìn)行無時效變化試樣，頻繁的放到樣品池中，在一個相對較短的時間段之內(nèi)，多次測量，后發(fā)現(xiàn)的一致性，稱之為隨機誤差。光度重復(fù)性是研究與分析結(jié)果時，重要的參考對象，也是主要的影響因素，后的值是否準(zhǔn)確，與光度重復(fù)性有直接關(guān)聯(lián)，是關(guān)鍵性的技術(shù)指標(biāo)。

5 結(jié)語

在能夠正確理解分光光度計技術(shù)指標(biāo)的基礎(chǔ)之上，在結(jié)合正確的檢測方法，每一個環(huán)節(jié)都重視起來，只有這樣才能夠保證后結(jié)果的準(zhǔn)確性。